酵母の形質転換 | |
宿主細胞を用意(10^7-10^8cells/mL を 1mL/tube使用)*1 | |
↓ 10,000rpm 1min(チビタン) | |
水か0.1M LiOAcで細胞を洗う | |
↓ 10,000rpm 1min(チビタン) | |
下記のものを加える | |
50% PEG4000 | 240µL |
1M LiOAc | 36µL |
2mg/mL ssDNA*2 | 25µL |
切ったベクター*3 | 1-2µL |
PCR product*3 | 45µL |
↓ | |
RT 30min | |
↓ | |
42℃ 20min | |
↓ 卓上のチビタンで数秒、遠心 | |
上清を除き、水や培地を50µL加え、選択培地にやさしく播く |