#ref(http://hismoriya.com/HMwiki/media/pombe.png,around,right)
*分裂酵母情報 [#n62b39db]
分裂酵母の研究で必要な基礎情報をのせます。

**菌株について [#p8d5b014]

| 株の名前     | 遺伝子型      | 由来など         | 入手日 |
| Sp286        | h+/h+ ade6-M210/ade6-M216((ade6のアリルに関しては[[Forsburgのページ:http://www-rcf.usc.edu/~forsburg/plasmids.html]]を参照)) ura4-D18/ura4-D18((ura4-D14は完全欠失(リアルタイムPCRの結果, [[ura4-D14を作成した論文:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/3241624]]))) leu1-32/leu1-32    |  [[BIONEER:http://pombe.bioneer.co.kr/technic_infomation/MutantCreation.jsp]], 破壊株コレクションホスト       | 2007.10 |
| 972h          | h- | 千葉大学松浦氏, 野生株 |2006.8 |
| FY254        | h- ura4-D18 leu1-32 ade6-M210 can1-1 | [[ATCC:http://www.atcc.org/common/catalog/numSearch/numResults.cfm?atccNum=201402]] | 2007.8 |
| FY7652      | h- leu1-32 ura4-D18     | [[NRBP:http://yeast.lab.nig.ac.jp/nig/]]     | 2006.11 |
| FY7549      | h- leu1 ura4     | [[NRBP:http://yeast.lab.nig.ac.jp/nig/]]      |2006.11 |
| FY6955      | h- leu1 ura4-D18    | [[NRBP:http://yeast.lab.nig.ac.jp/nig/]]      |2006.11 |
| OM2           | h- leu1-32 |千葉大学松浦氏  |2006.8 |
| JY741         | h- ura-D18 leu1 ade6-M216 | 千葉大学松浦氏, growthが遅い |2006.8 |
| JY746         | h+ ura-D18 leu1 ade6-M210  | 千葉大学松浦氏 |2006.8 |
~
**プラスミドについて [#f3950bbd]
Pombeのプラスミドについて、Guide to Yeast Genetics and Molecular Biology PartAのPombeの章やこの[[Forsburgのページ:http://www-rcf.usc.edu/~forsburg/plasmids.html]]と文献1((文献1 &ref_paper(7590311);))に書いてあることをまとめると、

***複製起点と安定性について [#if913133]
-出学酵母の2ミクロンDNAは使えるが、安定に保持されない(脱落する)。
-Pombeの'''ars1'''を持つプラスミド(pSP2など)の方がすこし安定に保持される((Mitotic stability 30%, copy number 0.5, 文献1より))。
-'''stb'''というよくわからないDNA elementを持つプラスミド(pFL20) はかなり安定に保持される((Mitotic stability 62%, copy nunber 5, 文献1より))。
-'''ars3002'''をタンデムに持ったプラスミド([[pDblet:http://www.addgene.org/pgvec1?f=c&cmd=findpl&identifier=8848]])はかなり安定に保持される((Mitotic stability 73%, copy nunber 6, 文献1より))。

***多量体化について [#ue9a18c8]
-pDbletは2量体が多少見られる、pFL20は多量体は見られない、pSP2は多量体化することがある((文献1より))。

***マーカー遺伝子について [#yd6bca64]
-'''Sc_LEU2'''は'''Sp_leu1'''をよわく相補
-'''Sc_URA3'''は'''Sp_ura4'''をとても弱く相補

***プロトコル [#cc474f70]
-ランダムスポア解析
The RSA protocol is simple: Using a three day old cross check for the presence of asci under the light microscope. 1 ml of sterile distilled water is inoculated with a loopful of the cross, and glusalase (Dupont/NEN) is added to a final concentration of 0.5%. The mixture should be incubated overnight at 25-29°C or for at least 6 hours at 29°C. Glusalase is a crude snail gut enzyme that breaks down the ascus wall and kills vegetative cells. Between 200-1000 spores/plate can be plated out on YES Agar or selective medium. The plates are then incubated at an appropriate temperature until colonies form.

***抗体について [#we42c6ff]
-santa cruzから手に入るもの
-[[Cdc2抗体:http://www.scbt.com/datasheet-53217-cdc2-p34-y100.4-antibody.html]]
-[[Cdc13抗体:http://www.scbt.com/datasheet-53215-cdc13-6f11-2-antibody.html]]

#br
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